克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/27 02:55:35
![克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.](/uploads/image/z/6517369-1-9.jpg?t=%E5%85%8B%E9%9A%86%E4%B8%80%E4%B8%AA%E6%9C%AA%E7%9F%A5%E7%9A%84%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E6%8B%BF%E5%88%B0%E5%BA%8F%E5%88%97%E9%9C%80%E8%A6%81%E5%A4%9A%E4%B9%85%3F%E6%88%91%E6%83%B3%E5%85%8B%E9%9A%86%E4%B8%80%E4%B8%AA%E6%9C%AA%E7%9F%A5%E7%9A%84%E5%9F%BA%E5%9B%A0%2C%E7%AE%80%E5%B9%B6%E5%BC%95%E7%89%A9%E5%8F%8D%E8%BD%AC%E5%BD%95%E5%86%8DRACE%E5%85%A8%E9%95%BF.%E4%B8%8D%E5%81%9A%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E7%9A%84%E8%AF%9D%E8%A6%81%E5%A4%9A%E4%B9%85%3F%E4%BF%9D%E5%AE%88%E4%BC%B0%E8%AE%A1.%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E4%B8%8D%E6%98%AF%E7%89%B9%E5%88%AB%E5%81%8F%2C%E6%98%AF%E5%8F%97%E4%BD%93%E4%BA%9A%E5%9F%BA.%E9%B1%BC%E8%84%91.)
克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?
我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?我想克隆一个未知的基因,简并引物反转录再RACE全长.不做表达的话要多久?保守估计.基因不是特别偏,是受体亚基.鱼脑.
在设备齐全的情况下,从最初分析开始呢,需要的时间大体是:
1 分析序列,设计简并引物,送公司合成引物需要等4-5天.等的过程中提取RNA和反转录时间足够了.
2 引物合成送到后,使用制备好的脑 cDNA模板利用简并引物进行PCR,然后电泳检测,这个阶段紧凑的话1-2天.
3 如果成功克隆出了目的条带,那么就要回收,做TA克隆,然后测序.简并引物克隆出的条带貌似不太适合直接回收测序的.片段回收、与T载体连接过夜、连接后转化至感受态细菌、涂板过夜培养、单克隆小量培养、鉴定单克隆、阳性克隆送样测序、测序结果回来.这个过程需要8-10天.
4 如果测序成功了,那么继续做RACE.重复1、 2、 3步 .
一切顺利的话,30-40天的功夫吧...
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