醋酸纤维薄膜电泳牛血清蛋白分离不好有什么具体的改进方法我们是武汉的,实验室内大概二十六七度,我们有五个小组都用pH为8.6的巴比妥缓冲液(1.66g巴比妥和12,.76g巴比妥钠定容至1000ml)来
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/27 17:00:38
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醋酸纤维薄膜电泳牛血清蛋白分离不好有什么具体的改进方法
我们是武汉的,实验室内大概二十六七度,我们有五个小组都用pH为8.6的巴比妥缓冲液(1.66g巴比妥和12,.76g巴比妥钠定容至1000ml)来电泳,两个电极之间约为12cm,教材上是110V电泳1个小时,最低有用90V电泳一个小时,有用130V电泳一个小时(蛋白质后来变性了),有先用110V半个小时后再用150V电泳20min,最后效果都不太好,大部分只有两条带,极个别出现3条带,其他操作感觉问题都不太大,请问有什么具体的建议能让结果有所改进,
醋酸纤维薄膜电泳牛血清蛋白分离不好有什么具体的改进方法我们是武汉的,实验室内大概二十六七度,我们有五个小组都用pH为8.6的巴比妥缓冲液(1.66g巴比妥和12,.76g巴比妥钠定容至1000ml)来
1将准备好的薄膜划线面朝下,与巴比妥——巴比妥钠缓冲液中充分浸透(约30min)
2,电泳开始的10min内电流调为0.3mA/CM膜宽,10min后调至0.6mA/cm膜宽.电泳60min,待电泳区带展开2.5-3.5cm时断电
3,漂洗时间与透明的时间掌握与浸液次序也很重要.
我当时用了人血清,五个条带都很清晰.参考文献来自《生物化学与分子生物学》,兰州大学出版社.祝您成功!
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