单相琼脂扩散试验原理、方法哪位能简单介绍一下?这类生物知识在哪里可以了解?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/29 22:13:44
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可以去生物帮那里了解,生物帮是生物方面比较优秀的网站,资讯信息比较丰富.这是一种定量试验,将一定量的抗体混合于琼脂内,倾注于玻片上,凝固后,在琼脂层上打孔,再将抗原加入孔中,使其向四周扩散.抗原抗体复合物形成的沉淀环直径与抗原的浓度成正比.如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线,则未知标本中的抗原含量即可从标准曲线中求出.本试验主要用于检查标本中各种免疫球蛋白和血清IgG含量.材料 1.抗体:羊抗人IgG单价抗血清.2.抗原:待检血清.3.3%生理盐水琼脂、生理盐水、载玻片、直径3mm打孔器、小三角烧瓶、毛细滴管、湿盒.可 参考:That can help you.Click www.bio1000.com/zt/focus/agar.htm,Sign in account.方法 1制备含抗体的琼脂板 取羊抗人IgG单价抗血清一瓶(效价1:80),量取0.3ml于一小三角烧瓶中,加生理盐水11.7ml(40倍稀释混匀,置56℃水浴中恒温2~3分钟).取3%生理盐水琼脂一管,隔水加热使溶,然后置56℃水浴中,待琼脂温度降至56℃时,立即加入等量1:40稀释抗血清,迅速轻轻混匀,勿使产生气泡,迅速倾入载玻片上,每片3.5ml,待凝固后打孔.如下图所示.2、稀释待检血清 将待检血清用生理盐水作40倍稀释,3、打孔、加样 每份检样加两孔,加满(但不要溢出),加样时毛细滴管尖端不要划破琼脂.4、温育 将琼脂板置搪瓷盒,垫湿纱布或海绵以防干燥,37℃恒温箱24h.结果观察与分析 测量并求出每份检样两孔的沉淀环平均直径,按照标准曲线求出IgG含量.