一个乙醇引起蛋白质变性实验,有几个不明白的地方乙醇引起的变性与沉淀 取3支试管,编号.依顺序加入试剂: 试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL 试管二: 5%卵清蛋白溶
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/02 01:28:37
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一个乙醇引起蛋白质变性实验,有几个不明白的地方乙醇引起的变性与沉淀 取3支试管,编号.依顺序加入试剂: 试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL 试管二: 5%卵清蛋白溶
一个乙醇引起蛋白质变性实验,有几个不明白的地方
乙醇引起的变性与沉淀
取3支试管,编号.依顺序加入试剂:
试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL
试管二: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的NaOH溶液各1mL
试管三: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的HCl溶液各1mL
振摇混匀后,观察各管有何变化.放置片刻,向各管内加水8毫
升,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红.再分别用0.1当量/升醋酸溶液及0.1当星/升碳酸钠溶液中和之.观察各管颜色的变化和沉淀的生成.每管再加0.1当量/升盐酸溶液数滴,观察沉淀的再溶解.解释各管发生的全部现象.
我的问题:蛋白质在等电点处的溶解度最小,会有沉淀现象,
可以证明沉淀是乙醇引起的蛋白质变性吗?
还有后来继续加入盐酸的目的是什么?
其实整个思路都不太眀了,最好详细解答一下啦,满意有追加
一个乙醇引起蛋白质变性实验,有几个不明白的地方乙醇引起的变性与沉淀 取3支试管,编号.依顺序加入试剂: 试管一: 5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL 试管二: 5%卵清蛋白溶
首先,只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性,低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构(氢键)破坏而沉淀析出,类似于盐析.其次,变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变.你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%,而且最后蛋白会再溶解.因此,这个实验不足以证明蛋白质变性.
后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点,增大蛋白质的溶解度,进而使蛋白质再溶解.
由你所说,试剂是按顺序加入的,所以在加入乙醇时三支试管里的蛋白质就都已经变性了,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红会因为酸碱变成相应的颜色,因为酸碱没有与蛋白质反应,乙醇已经与蛋白质反应完了,再分别用0.1当量/升醋酸溶液及0.1当星/升碳酸钠溶液中和之后甲基红会恢复原色,即中性的颜色,因为酸碱都中和了...
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由你所说,试剂是按顺序加入的,所以在加入乙醇时三支试管里的蛋白质就都已经变性了,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红会因为酸碱变成相应的颜色,因为酸碱没有与蛋白质反应,乙醇已经与蛋白质反应完了,再分别用0.1当量/升醋酸溶液及0.1当星/升碳酸钠溶液中和之后甲基红会恢复原色,即中性的颜色,因为酸碱都中和了
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